有过一次高危行为不一定会感染艾滋病。艾滋病病毒感染需要满足特定条件，如病毒载量、暴露方式及机体免疫状态等综合因素决定。
高危行为指可能造成体液交换的性行为或血液接触行为，如无保护性交、共用注射器等。但单次暴露的感染概率受多重因素影响，若暴露源处于急性感染期或晚期，病毒载量较高时风险相对增加。暴露后2小时内服用阻断药物可降低80%以上感染风险，72小时内仍有一定效果。皮肤黏膜完整性也是重要因素，无破损的完整皮肤接触病毒几乎无感染可能。
存在极少数特殊情况可能影响感染概率。若暴露者本身存在未愈合的生殖器溃疡或口腔伤口，病毒通过黏膜破损进入的概率会上升。暴露源若同时合并其他性传播疾病，可能增强病毒穿透能力。某些遗传基因缺陷如CCR5Δ32突变人群对HIV-1具有天然抵抗力。
建议发生高危行为后及时到传染病专科医院或疾控中心进行专业风险评估，暴露后24-72小时是阻断治疗的黄金窗口期。日常应正确使用安全套，避免共用针具，定期检测HIV抗体。窗口期后需进行多次检测排除感染，初期检测阴性者应在3个月后复查确认。