排卵试纸通过检测尿液中黄体生成素的浓度变化来预测排卵时间，其原理基于黄体生成素在排卵前的激增现象。
排卵试纸的核心检测目标是黄体生成素，这是一种由垂体前叶分泌的激素。在月经周期中，随着卵泡发育成熟，雌激素水平上升会刺激黄体生成素大量释放，形成排卵前24-48小时的浓度高峰。试纸采用单克隆抗体技术，当尿液中黄体生成素达到阈值时，抗体发生特异性结合反应，通过显色条带呈现结果。检测线颜色达到或深于对照线即提示阳性，意味着即将发生排卵。这种激素激增具有突然性，因此建议每天固定时间检测以避免漏测峰值。
部分女性可能出现黄体生成素水平波动较小或峰值持续时间短的情况，此时试纸可能出现弱阳性或难以捕捉峰值。多囊卵巢综合征等内分泌疾病患者因激素紊乱可能导致假阳性。试纸无法直接监测卵泡破裂过程，仅反映激素变化趋势，需结合基础体温、宫颈黏液观察提高准确性。不同品牌试纸的灵敏度差异也会影响检测结果解读。
使用排卵试纸时应选择上午10点至晚上8点之间的固定时段检测，检测前2小时减少饮水以避免尿液稀释。建议从月经周期第10天开始每日检测，发现弱阳性后改为每12小时检测一次。检测时需直接将试纸置于尿流中或浸入尿液5秒，平置10分钟后判读结果。避免使用晨尿因夜间激素浓缩可能造成假阳性。同时记录检测结果形成曲线更利于判断峰值，备孕者可在此后24小时内增加同房频率。若连续3个月未测到阳性或周期不规律超过35天，建议就医排查内分泌异常。