青霉素和头孢的主要区别在于抗菌谱、化学结构及耐药性，两者均为β-内酰胺类抗生素，但适用于不同感染类型。
青霉素对革兰阳性菌如链球菌、肺炎球菌作用较强，但对β-内酰胺酶不稳定，易被耐药菌分解失效。头孢类抗生素根据代次不同抗菌谱差异显著：一代头孢如头孢唑林侧重革兰阳性菌；二代头孢如头孢呋辛兼顾部分革兰阴性菌；三代如头孢曲松及四代头孢如头孢吡肟则对革兰阴性菌覆盖更广，且对β-内酰胺酶稳定性更高。
化学结构上，头孢类抗生素的β-内酰胺环与二氢噻嗪环融合，使其分子稳定性优于青霉素的噻唑烷环，因此过敏反应概率相对较低。临床选择时，青霉素更适用于敏感菌引起的轻中度感染如扁桃体炎，而头孢类多用于复杂感染或青霉素耐药情况。
使用前需进行皮试排除过敏风险，避免与酒精同服。治疗期间应监测肝肾功能，若出现皮疹或呼吸困难需立即停药就医。根据感染病原体培养结果调整用药方案，不可自行更换或延长疗程。