李婷婷副主任医师 山东大学齐鲁医院 普通内科
骨髓瘤细胞培养是指在体外实验室条件下,通过特定培养基和环境控制,使骨髓瘤细胞持续增殖的技术操作。骨髓瘤是一种浆细胞恶性增殖性疾病,其细胞培养主要用于科研、药物筛选及单克隆抗体制备等领域。
骨髓瘤细胞培养依赖于模拟体内微环境的无菌培养基,通常添加胎牛血清、生长因子等营养成分。培养条件需维持37摄氏度恒温、5%二氧化碳浓度及适宜湿度,确保细胞代谢活性。实验室常用骨髓瘤细胞系如SP2/0、NS0等均需定期传代防止过度密集。
培养过程需在生物安全柜中进行无菌操作,包括细胞复苏、换液、传代及冻存。使用胰蛋白酶消化贴壁细胞后,按比例稀释接种至新培养瓶。定期观察细胞形态和密度,通过台盼蓝染色评估存活率,避免支原体污染影响实验结果。
该技术是制备杂交瘤细胞的关键步骤,可生产用于疾病诊断的单克隆抗体。在抗癌药物研发中,骨髓瘤细胞模型能筛选靶向治疗药物。科研领域通过基因编辑培养的细胞系,有助于研究浆细胞恶性转化机制。
需定期检测细胞STR基因分型确保身份真实性,排除交叉污染。培养基pH值稳定在7.2-7.4,更换频率依据细胞生长速度调整。采用液氮冻存技术长期保存细胞时,需添加二甲基亚砜作为保护剂。
操作者需穿戴防护装备避免生物危害,废弃培养物须高压灭菌处理。细胞状态异常表现为颗粒增多、空泡化时需终止实验。培养设备如二氧化碳培养箱应每月校准,并记录温度、气体浓度波动情况。
进行骨髓瘤细胞培养须在专业实验室规范操作,研究人员应接受生物安全培训。培养过程中出现污染或细胞凋亡需及时处理,定期检测支原体确保实验可靠性。相关研究应遵循伦理审查要求,临床级细胞培养需符合GMP标准。