结膜炎可通过裂隙灯检查、分泌物涂片、过敏原检测、泪液功能评估等方式诊断，病因主要包括细菌感染、病毒感染、过敏反应或环境刺激。
使用裂隙灯显微镜观察结膜充血程度、滤泡增生及角膜受累情况，细菌性结膜炎常见睑结膜充血伴脓性分泌物，病毒性结膜炎多伴耳前淋巴结肿大。
取结膜囊分泌物进行革兰染色或吉姆萨染色，细菌感染可见中性粒细胞和病原体，过敏性疾病以嗜酸性粒细胞为主，衣原体感染需特殊培养鉴别。
慢性结膜炎患者需进行血清IgE检测或皮肤点刺试验，常见过敏原包括花粉、尘螨，过敏性结膜炎表现为结膜苍白水肿伴透明丝状分泌物。
通过泪膜破裂时间测定或Schirmer试验评估泪液分泌量，干眼症继发结膜炎可见黏液蛋白丝，需与干燥综合征等全身性疾病鉴别。
出现眼睑红肿、畏光流泪等症状应及时就诊眼科，检查前24小时避免使用眼药水，过敏性结膜炎患者需记录接触史协助诊断。
