艾滋试纸有效观察时间一般为15-30分钟，实际时间受到试纸类型、操作规范、环境温度、样本质量等多种因素的影响。
1、试纸类型不同品牌艾滋试纸的显色反应速度存在差异，胶体金法试纸通常需要20分钟，而乳胶法试纸可能需30分钟完成结果判读。
2、操作规范未按说明书要求滴加足量血液或缓冲液会导致显色延迟，操作时须确保样本完全覆盖检测区并启动计时装置。
3、环境温度室温低于10℃可能延缓抗原抗体结合速度，建议在18-30℃环境下检测，冬季可将试纸回温后再使用。
4、样本质量溶血、凝血或污染样本会影响检测效率，采血时应弃用第一滴血，使用新鲜指尖血或静脉血效果更可靠。
建议在有效观察时间结束后10分钟内读取结果，超时显示的阳性线可能为蒸发线假象，任何异常结果都需通过医院实验室复检确认。
