阴道横隔可通过妇科检查、影像学检查、症状评估及病史询问等方式诊断，多数患者需结合专业医疗手段确诊。
医生通过触诊和窥阴器检查可发现阴道内横向隔膜，初步判断隔膜位置及厚度，部分完全性横隔可见经血潴留。
超声或核磁共振能清晰显示隔膜形态，区分完全性或不完全性横隔，同时评估子宫、卵巢等盆腔器官是否合并畸形。
青春期后出现周期性下腹痛但无月经来潮，或性交困难、经血排出不畅等症状，可能提示完全性或厚型不完全性横隔。
了解初潮年龄、月经特征及生育史，先天性阴道横隔多合并泌尿系统畸形，需排查是否存在重复肾、输尿管异位等异常。
确诊后根据隔膜类型选择手术切除，术后需定期随访防止粘连，青春期前发现的无症状薄型隔膜可暂观察。
