hpv的检测步骤是什么
时间:2023.05.08 16:23 作者:成都润禾皮肤病专科医院
成都润禾皮肤病专科医院
时间:2023.05.08 16:23 作者:成都润禾皮肤病专科医院
HpV学名是人乳头瘤病毒,患者病情严重的话会恶变为宫颈癌。科学家已证实,此病毒是一种基因病毒,且是一种只有人类才会生的病。人类在感染该病毒后,会有一个长时间的潜伏期,一旦病毒的时机到了就会致病。而HpV的检测在很大程度上提高了检出率,而检测方法是基于细胞学检查,本文将简要介绍这些方法。
1、现有的HpV实验室主要检测手段:
①聚合酶链反应(pCR,
polymeraseChainReaction):扩增位于两段已知序列之间的DNA片断的方法。该法有较高的敏感度,可进行HpV分型,缺点是对实验室环境要求较高,容易发生样本间的交叉污染,从而导致假阳性率高。
②核酸杂交检测
有较好的特异性和敏感度,还可以进行HpVDNA的分型,各种核酸杂交检测方法有一定的优缺点。
A核酸印迹原位杂交
适用于HpV分型和HpVDNA分子量鉴定,虽然灵敏度高,但因操作复杂,需要新鲜组织标本,不便在临床上大规模使用。
B斑点印迹
其敏感度和特异性均低于核酸印迹原位杂交法,虽然经济实用,但实验过程存在有放射性污染,是环保所不能轻视的问题。
C原位杂交(insituhybridization,一种核酸杂交技术,可用来测定基因或特定核苷酸序列在核酸分子的所在部位,检测重组体DNA)通过非放射性探针对石蜡组织进行检测,能作定位检测,假阳性率低,但灵敏度不高,大大降低了临床使用价值。
D杂交捕获法(HybridCapture)
杂交捕获试验是利用化学发光对抗体捕获的信号加以放大。首先使DNA双链释放并分解成为可以杂交的核苷酸单链,DNA单链与RNA组合探针结合为RNA-DNA杂合体,特异性抗体将RNA-DNA杂合体捕获,偶联有碱性磷酸酶的第二抗体与RNA-DNA杂合体结合,碱性磷酸酶使酶底物发光,根据光的强弱可确定碱性磷酸酶的含量,从而确定RNA-DNA杂合体的含量。能检测13种高危型HpV,包括HpV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68。
2、新推出的HpV的实验室检测技术
高灵敏度高危型HpV分型多色荧光实时pCR试剂:为欧洲著名分子生物学研究机构专门针对宫颈癌筛查而全新设计的高危型HpV分型多色荧光实时pCR检测试剂,可同时检测高危型中主要的16、18、31/33、35/45型。