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目前，诊断疱疹感染的“金标准”是分开病毒并确定其类型。该方法的灵敏度为80-，对病原体的准确定义为，但需要2-5天才能得出结果。病毒是从病变[皮肤、粘膜、角膜]中分开出来的。它能够在尿道、宫颈管、喉部、唾液、粪便中发现，无论是在原发感染期间还是在疾病的无症状期间。在这方面，单纯疱疹病毒的分开本身就足以证明是他是这种疾病的原因。

它们在初次感染后的第4-7天出现在血清中，在2-3周后达到高峰，并且能够持续终生。为了建立诊断，了解在疾病过程中抗体数量增加了多少非常重要。在血液中检测到它们并不意味着什么。大多数成年人的血液中始终存在抗体。诊断需要通过实验室检查来确认。

在同时具有生殖疱疹症状和疱疹病毒抗体的患者中诊断出复发性感染。复发的诊断相当困难，因为体温升高的时间很短，并且可能没有明显的疾病和不适迹象。

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