新生儿败血症最常见的感染途径是母婴垂直传播，主要通过胎盘感染、产道感染及产后密切接触传播。其他感染途径还包括医疗器械接触、皮肤黏膜破损等。
母婴垂直传播是新生儿败血症的主要感染方式。病原体可通过胎盘血液循环直接进入胎儿体内，常见于母亲存在绒毛膜羊膜炎、尿路感染或败血症等情况。分娩过程中，胎儿经过产道时可能吸入或吞咽含有病原体的分泌物，尤其是B族链球菌和革兰阴性杆菌易通过该途径感染。产后母乳喂养或护理过程中的密切接触，也可能导致病原体通过呼吸道或消化道侵入新生儿体内。
医疗器械接触感染多发生在住院治疗的新生儿中，如气管插管、脐静脉导管等侵入性操作可能将病原体直接引入血液循环。皮肤黏膜破损后，金黄色葡萄球菌等条件致病菌可经微小创口进入体内，早产儿因皮肤屏障功能不完善更易发生此类感染。部分病例也可能通过医护人员手部卫生不合格造成交叉感染。
预防新生儿败血症需加强产前检查，对存在感染的孕妇应及时治疗；分娩时严格消毒产道，对高危新生儿可预防性使用抗生素；日常护理中注意手部清洁，避免交叉感染；母乳喂养前做好乳房清洁，定期消毒奶具；发现新生儿出现体温异常、喂养困难、皮肤黄疸等症状时需立即就医。保持新生儿皮肤完整，脐部护理使用75%酒精每日消毒，衣物选用纯棉材质减少摩擦刺激。