大肠杆菌在100度高温下1-3分钟即可被杀死。具体时间与菌量、环境湿度等因素有关。
大肠杆菌对高温敏感，在沸水环境中会快速失去活性。实验室数据显示，少量大肠杆菌在持续沸腾的液体中1分钟内死亡率可达较高水平。若菌量较多或存在有机物保护，可能需要延长至3分钟才能确保完全灭活。日常烹饪中，食物中心温度达到100度并维持1分钟以上，即可有效杀灭常见污染量的大肠杆菌。对于含水量低的干燥物品，需要更长时间的热处理才能穿透深层细菌。使用高压蒸汽灭菌器时，121度条件下15-20分钟可彻底灭活包括芽孢在内的所有微生物，但普通煮沸无法达到该效果。
为预防大肠杆菌污染，建议肉类食品充分加热至中心无粉红色，处理生食后及时用肥皂洗手，砧板刀具需生熟分开并用沸水烫洗。蔬菜水果建议流水冲洗后去皮食用，婴幼儿奶瓶等器具应每日煮沸消毒。出现腹泻腹痛等症状时应及时就医，避免自行服用抗生素。日常注意冰箱冷藏室保持4度以下，冷冻室维持零下18度，可有效抑制细菌繁殖。