叶酸片的服用时间需根据个体情况决定，备孕期及孕早期女性通常需持续服用至孕12周，存在高危因素者可能需延长至分娩或哺乳期。
备孕女性应从孕前3个月开始每日补充0.4-0.8毫克叶酸片，持续至确认妊娠后满12周。这个阶段是胎儿神经管发育的关键期，规律补充可降低神经管缺陷风险。普通孕妇在孕12周后可通过均衡饮食获取叶酸，但存在妊娠期高血压、贫血或同型半胱氨酸代谢异常等情况时，医生可能建议继续服用至分娩。哺乳期女性若膳食摄入不足，也可能需要维持每日0.4毫克补充量。
长期大剂量服用叶酸片可能掩盖维生素B12缺乏症状，每日补充量超过1毫克应在医生指导下进行。胃肠道手术史、慢性溶血性贫血等特殊人群，需根据血液检查结果调整用药周期。部分遗传代谢疾病患者甚至需要终身补充叶酸。
日常饮食可多选择动物肝脏、深绿色蔬菜、豆类等天然叶酸含量高的食物，烹饪时避免长时间高温加热。备孕及孕期女性应定期进行血清叶酸检测，根据检测结果和医生建议调整补充方案。突然停用叶酸前应咨询医生，避免因叶酸水平骤降影响母婴健康。