八爪鱼的胆固醇含量较高，每100克可食用部分约含胆固醇130-150毫克，属于中高胆固醇含量的海鲜类食物。
八爪鱼作为软体动物，其肌肉组织中含有较多胆固醇，主要集中于头部和内脏部位。新鲜八爪鱼的胆固醇含量与鱿鱼相近，但低于动物内脏类食物。胆固醇是细胞膜的重要组成成分，但过量摄入可能增加血液中低密度脂蛋白水平。健康人群每日胆固醇摄入建议不超过300毫克，高血脂或心血管疾病患者需控制在200毫克以内。烹饪方式会影响实际摄入量，水煮或清蒸比油炸更能减少额外脂肪吸收。
建议将八爪鱼作为阶段性食材而非日常食物，每周食用不超过1-2次，每次控制在80-100克。搭配富含膳食纤维的蔬菜水果如西蓝花、苹果等，有助于胆固醇代谢。避免与动物内脏、蛋黄等高胆固醇食物同餐食用。高胆固醇血症患者食用前应咨询营养师，监测食用后血脂变化。选择新鲜八爪鱼时注意观察肉质弹性与气味，变质海鲜会产生更多氧化胆固醇。保持多样化饮食结构，适当增加深海鱼类摄入以获取有益的不饱和脂肪酸。