长效青霉素主要用于预防和治疗由敏感菌引起的感染，如溶血性链球菌感染、梅毒等，通过抑制细菌细胞壁合成发挥长效抗菌作用。
长效青霉素可每月肌注一次，持续预防溶血性链球菌感染导致的复发性风湿热，需定期监测肾功能。
苄星青霉素作为梅毒一线用药，能长效杀灭梅毒螺旋体，晚期梅毒需延长疗程并配合血清学检测。
特定心脏手术或牙科操作前使用，预防草绿色链球菌引起的心内膜炎，过敏者需改用大环内酯类。
对肺炎链球菌、破伤风杆菌等敏感菌引起的感染有效，严重感染需联用其他抗生素增强疗效。
使用前需严格皮试排除过敏，注射部位可能出现硬结，治疗期间须遵医嘱定期复查相关指标。
