维生素D2和维生素D3在来源、代谢途径及生物活性上存在差异，但两者均具有调节钙磷代谢、促进骨骼健康的生理功能。维生素D2主要来源于植物性食物或酵母，维生素D3则通过皮肤合成或从动物性食物中获取。
维生素D2由麦角固醇经紫外线照射转化而来，常见于蘑菇、强化谷物等植物性食品。维生素D3则通过人体皮肤中的7-脱氢胆固醇在阳光照射下合成，或从鱼肝油、蛋黄、乳制品等动物性食物中摄取。
维生素D2需在肝脏转化为25-羟基维生素D2，再经肾脏活化为1，25-二羟基维生素D2。维生素D3则先转化为25-羟基维生素D3，其与维生素D结合蛋白的亲和力更高，在血液循环中的半衰期更长。
维生素D3的羟基化效率更高，相同剂量下可使血清25-羟基维生素D水平提升更显著。部分研究显示维生素D3在维持长期血药浓度方面更具优势，但两者在常规剂量下均能有效预防佝偻病和骨质疏松。
维生素D2常用于素食者或对动物成分敏感人群的补充，临床常用剂型为维生素D2软胶囊。维生素D3更普遍用于普通人群，剂型包括维生素D3滴剂、维生素D3碳酸钙片等。两者均需在医生指导下根据检测结果调整剂量。
维生素D3对光热更稳定，适合添加至乳制品等载体中。维生素D2在酸性环境中易降解，需避光密封保存。市售复合维生素中多采用维生素D3，因其生物活性更接近人体天然代谢产物。
日常可通过适量日晒、食用富含维生素D的食物如海鱼、蛋黄等辅助补充。使用补充剂时应定期监测血钙和25-羟基维生素D水平，避免过量摄入导致高钙血症。合并肝肾功能异常者需在医生指导下调整补充方案。
