青霉素主要用于治疗由敏感菌引起的感染性疾病，包括链球菌感染、肺炎球菌感染、梅毒、淋病等，对革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌均有抑制作用。
青霉素可有效治疗A组β-溶血性链球菌引起的咽炎、猩红热，通过破坏细菌细胞壁合成达到杀菌效果。
对青霉素敏感的肺炎链球菌所致肺炎、中耳炎等，青霉素能快速抑制细菌增殖，需注意部分菌株已出现耐药性。
作为各期梅毒的首选药物，青霉素可穿透血脑屏障清除中枢神经系统内的梅毒螺旋体。
对不产青霉素酶的葡萄球菌、脑膜炎奈瑟菌等引起的感染也具疗效，使用前必须进行皮试以避免过敏反应。
使用青霉素期间应避免饮酒，完成规定疗程，出现皮疹、呼吸困难等过敏症状需立即就医。
