根据典型病史，受累骨骼肌极易疲劳，经休息和服用抗胆碱酯酶药物后有所好转可予诊断。不典型者可作进一步诊断性试验。
1.疲劳试验受累肌肉重复收缩后出现无力。如令患者眼球上视，观察眼睑无力而下垂时为阳性。
2.药物试验
(1)新斯的明试验：肌内注射0.5～1mg，30分钟后症状好转为阳性。
(2)依酚氯铵试验：静脉注射2mg，观察20秒，如无反应则用30秒缓慢加给8mg，1分钟内症状好转者为阳性。
3.重复电刺激单纤维肌电图低频(3Hz)和高频(30～50Hz)刺激尺神经或面神经，如出现动作电位递减10%以上为阳性。阳性率约70%。