叶酸片早上或晚上服用均可，具体时间可根据个人作息和胃肠耐受性调整。
早晨空腹服用叶酸片有助于提高吸收率，胃酸分泌较少时药物溶解更充分。部分人群晨起后胃肠蠕动活跃，可能加快叶酸进入吸收部位的速度。若选择餐后服用，需注意与高纤维食物间隔两小时，避免膳食纤维影响吸收。对于需要同时补充铁剂者，建议错开服用时间以防止相互干扰。
夜间服用叶酸片可减少光敏反应风险，尤其适合日间户外活动较多者。睡前服药能利用睡眠期间稳定的胃肠环境，降低胃部不适概率。但存在夜尿频繁或睡眠障碍者，可能因服药影响休息质量。部分人群夜间代谢速率减缓，需关注长期服用是否导致血药浓度波动。
备孕或妊娠期女性建议固定时间服用以维持血药浓度稳定，可搭配每日固定活动如早餐或刷牙作为服药提醒。存在慢性胃炎等胃肠疾病者，应根据症状发作规律选择胃肠刺激较小的时间段。服用期间出现恶心等不适可尝试调整为随餐服用，必要时咨询医生调整剂量或剂型。保持规律作息和均衡饮食有助于提升叶酸利用效率，避免同时摄入酒精或浓茶等影响吸收的物质。