甲氨蝶呤不能与磺胺类药物、非甾体抗炎药、丙磺舒、青霉素类药物等合用，可能增加毒性或降低疗效。
磺胺类药物如复方磺胺甲噁唑会竞争血浆蛋白结合位点，导致甲氨蝶呤血药浓度升高，可能引发骨髓抑制或肝肾损伤。需监测血常规及肝肾功能。
布洛芬、阿司匹林等药物可能减少甲氨蝶呤肾脏排泄，增加黏膜炎和血液系统毒性风险。联合使用时应调整甲氨蝶呤剂量。
丙磺舒抑制肾小管排泄甲氨蝶呤，可能使血药浓度超过安全阈值。必要联用时需严格监测甲氨蝶呤血药浓度。
青霉素、阿莫西林等可能干扰甲氨蝶呤肠道吸收，降低治疗效果。建议间隔给药时间并检测药物浓度。
使用甲氨蝶呤期间应避免饮酒，定期复查血常规和肝肾功能，出现口腔溃疡或异常出血需立即就医。
