叶酸一般建议在早餐或午餐后半小时内服用，吸收效果较好。
饭后服用叶酸能减少空腹可能引起的胃肠不适。胃内有食物时，叶酸吸收速率相对稳定，配合食物的消化过程更有助于营养素的利用。对于需要长期补充叶酸的备孕女性或孕妇，建议固定每日服药时间以形成规律。普通成人每日补充量通常为0.4-0.8毫克，治疗性补充需遵医嘱调整剂量。
服用叶酸期间应避免同时饮用浓茶或咖啡，以防单宁酸影响吸收。酒精可能干扰叶酸代谢，建议控制饮酒。合并缺铁性贫血时，可与维生素C同服促进吸收。若需服用抗癫痫药、抑酸药等可能干扰叶酸的药物，建议间隔两小时以上。普通绿叶蔬菜如菠菜、西蓝花含有天然叶酸，但烹饪时注意避免长时间高温烹煮。
