维生素D滴剂在早上或晚上服用均可，具体时间可根据个人作息和医生建议调整。
维生素D属于脂溶性维生素，其吸收与食物中的脂肪含量相关。早晨随餐服用有助于利用早餐中的脂肪促进吸收，尤其适合饮食中含乳制品或坚果的人群。部分研究认为晨间补充可能更符合人体自然节律，因阳光照射可促进皮肤合成维生素D，而白天服用可能强化这一生理过程。对于胃部敏感者，晨服可减少夜间胃肠不适的风险。若早晨服用，建议选择固定时间以形成规律，避免漏服。
夜间服用同样具有合理性，晚餐通常是一天中脂肪含量较高的餐次，有利于维生素D溶解吸收。有观点认为睡前补充可能帮助调节褪黑素分泌，间接改善睡眠质量，但缺乏明确证据支持。对于日间工作繁忙易忘服药的人群，晚间服用可作为备选方案。需注意避免与含钙、镁的补充剂同服，以防影响吸收效率。存在胃食管反流者应谨慎选择睡前服用，以防加重症状。
无论选择何时服用，均需保持每日剂量稳定，避免与矿物油类泻药、抗癫痫药物同服。长期服用者应定期监测血钙和25-羟维生素D水平，夏季户外活动充足时可酌情减量。儿童及孕妇应在医生指导下调整服用时间，骨质疏松患者需配合钙剂补充。储存时需避光防潮，开封后建议在有效期内使用完毕。
