血清胰岛素测定方法主要有放射免疫分析法、酶联免疫吸附试验、化学发光免疫分析法、电化学发光免疫分析法和免疫荧光分析法。
1、放射免疫分析法放射免疫分析法利用放射性同位素标记的胰岛素与样本中的胰岛素竞争结合特异性抗体，通过测量放射性强度来定量胰岛素浓度。该方法灵敏度较高，但存在放射性污染风险，操作需在特定防护条件下进行。适用于科研机构和具备放射防护条件的实验室，可检测空腹及餐后胰岛素水平。
2、酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验采用酶标记的二抗与胰岛素抗体结合，通过酶促反应显色测定胰岛素含量。操作相对简便，无需特殊防护设备，适合常规医疗机构开展。可配合葡萄糖耐量试验评估胰岛β细胞功能，但易受溶血、脂血样本干扰，需严格控制实验条件。
3、化学发光免疫分析法化学发光免疫分析法通过化学反应产生光信号进行检测，具有灵敏度高、线性范围宽的特点。全自动化仪器可减少人为误差，适合大批量样本检测。需定期校准仪器，避免发光底物降解影响结果准确性，常用于糖尿病诊断和胰岛素抵抗评估。
4、电化学发光免疫分析法电化学发光免疫分析法结合电化学与发光技术，采用钌标记物产生特异性信号。检测速度快，重复性好，抗干扰能力强，可准确区分内源性胰岛素与外源性胰岛素类似物。需要专用检测系统和配套试剂，多用于内分泌代谢疾病的精准诊断。
5、免疫荧光分析法免疫荧光分析法使用荧光标记物检测胰岛素，通过荧光读数仪定量分析。操作流程标准化程度高，适合基层医院开展。需注意避免样本反复冻融导致蛋白变性，适用于糖尿病筛查和妊娠期血糖监测，可同时检测C肽等指标。
进行血清胰岛素检测前需空腹8-12小时，避免剧烈运动影响基础值。采血后应及时分离血清，溶血样本会导致假性升高。糖尿病患者检测时应同步监测血糖，结合糖化血红蛋白等指标综合判断。不同测定方法结果可能存在差异，复查建议使用同种方法。若结果异常应结合临床表现进一步行胰岛素释放试验或胰岛素抗体检测，由内分泌科医生评估胰岛功能状态。
