硬下疳主要通过典型皮损特征和实验室检查确诊，表现为无痛性溃疡、基底硬化及淋巴结肿大，需与梅毒疹、生殖器疱疹等疾病鉴别。诊断依据包括暗视野显微镜检查、梅毒血清学试验、溃疡分泌物检测、病史采集、体格检查。
1、暗视野显微镜检查取溃疡底部渗出液在暗视野显微镜下观察，若发现螺旋体样微生物可初步诊断。该方法对一期梅毒硬下疳检出率较高，但需在皮损出现后1-2周内进行，晚期病灶中螺旋体数量减少可能影响结果。检查前24小时应避免局部用药或清洗。
2、梅毒血清学试验包括非特异性试验和特异性试验两类。非特异性试验如快速血浆反应素试验在感染后4-6周呈阳性，特异性试验如梅毒螺旋体颗粒凝集试验可帮助确诊。两种试验联合使用可提高准确性，但需注意窗口期可能出现假阴性。
3、溃疡分泌物检测通过聚合酶链反应技术检测分泌物中的梅毒螺旋体DNA，具有高敏感性和特异性。适用于早期硬下疳或血清学结果不确定时，能区分梅毒与其他溃疡性疾病。采样时需用无菌棉签刮取溃疡基底新鲜组织液。
4、病史采集重点询问高危性行为史、潜伏期及症状演变过程。典型硬下疳多在接触后3周左右出现，患者可能伴有腹股沟淋巴结无痛性肿大。需了解既往梅毒感染史和治疗情况，评估疾病分期及传染风险。
5、体格检查典型硬下疳表现为单发圆形溃疡，直径1-2厘米，边缘隆起且基底呈软骨样硬度，表面清洁无脓液。好发于外生殖器、肛门等部位，触诊无疼痛感。需全面检查全身皮肤黏膜及淋巴结，评估是否伴有二期梅毒疹。
确诊硬下疳后应避免性接触直至完成治疗，性伴侣需同步检查。治疗期间保持患处清洁干燥，穿宽松棉质内衣减少摩擦。规范使用青霉素类药物，治疗后定期随访血清学指标直至转阴。日常注意营养均衡，适当补充优质蛋白和维生素增强免疫力，避免熬夜、饮酒等影响免疫功能的行为。
